标记定量蛋白质组学
蛋白质组学是研究基因组表达的全部蛋白质或混合体系中所有蛋白质的科学。定量蛋白质组学就是精确的鉴定这些蛋白质的含量,目前研究定量蛋白质组学的技术主要包括标记(Label)和非标记(Label Free)两种策略,标记定量蛋白质组学就是采用标记的方法对蛋白质组进行定量研究的科学。
基于标签的蛋白质组定量技术分为体内标记和体外标记。常用的体内标记有细胞培养中氨基酸的稳定同位素标记(SILAC)和15^N标记等,它们通过在细胞培养中添加相应同位素标记的必需氨基酸,使细胞新陈代谢合成的蛋白质带上同位素标记。体外标记主要有相对定量和绝对定量等压标签(iTRAQ)以及串联质量标签(TMT)两种,二者的基本原理相似,都是将获得的蛋白质样品在体外进行标签标记,只是它们是由不同公司开发的不同的试剂标签,一次性标记的蛋白样品数量存在差异,TMT试剂盒一次最多能标记16种蛋白质,iTRAQ一次最多能标记10种蛋白质。
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