大鼠同种异体骨肉瘤骨内原位移植模型【疾病动物模型】

大鼠同种异体骨肉瘤骨内原位移植模型【疾病动物模型】

【造模机制】幼年期（<6周龄）大鼠免疫功能尚未完善，做大鼠骨肉瘤细胞株（UMR106或 ROCL-Am831）同种异体骨内原位移植，肿瘤细胞在缺乏有效免疫监视的条件下发生逃逸生长，也可以获得很高的成功率。

【模型特点】瘤细胞植入骨内后3周,骺端出现膨大，瘤区皮下可见丰富的迂曲小血管;切面可见骨皮质破坏断裂，肿瘤侵及软组织，腔内外的肿瘤呈鱼肉状；移植后4周，骺端球形膨大，肿块直径可达2～3cm大小，质中或稍硬，骨皮质破坏更明显；肺门及边缘有少量转移灶，大小不等（直径0.1~0.3cm）；移植后6周，肿瘤呈巨球形，质稍硬；切面骺端骨皮质已消失，仅见骨干残端；双肺见大量转移瘤，大小不等，部分瘤灶融合，灰白色；动物饮食减少，明显消瘦，精神委靡，有恶病质产生；移植后7周，右下肢肿瘤直径可达 3～5cm,双肺广泛转移灶，瘤灶融合，正常肺组织结构基本消失。模型鼠自然生存期约7周左右。光镜下瘤细胞弥漫性生长，细胞体积大，大小不一，深染，核圆形或卵圆形，核浆比例大，核仁清晰可见，病理性核分裂象多，细胞间质少，呈肉瘤特性；肺部转移灶瘤细胞与髓腔肿瘤形态结构一致，也可见肿瘤内部有大片坏死，骨基质钙盐沉积及肿瘤侵犯关节软骨现象。2~7周后血清碱性磷酸酶（ALP）水平模型鼠均高于正常鼠。

【造模方法】将由液氮保存的大鼠骨肉瘤细胞系 UMR 106 取出复苏后进行体外培养,传代增殖，得到对数生长期的骨肉瘤细胞备用。造模取30~40天龄 Wistar 大鼠，雌雄各半，盐酸氯胺酮注射液肌内注射麻醉(0.1g/kg)，碘酒酒精消毒下肢。在胫骨上部干骺端内侧或股骨下端外侧作切口，分离皮下组织暴露骨面后，用直径1mm克氏针轻柔钻入骨髓腔（有明显落空感），然后用12号输血针头沿此孔斜钻入髓腔，挖取其中骨髓和松质骨，形成一倾斜通道。用无血清 RPNM-1640培养液将备用骨肉瘤细胞稀释成 5×10°/ml,每个骨髓腔内注射 0.2ml,骨蜡封口，依次缝合肌膜、皮肤，消毒切口后包扎，送回笼中饲养观察，4周即可造模成功。

【应用范围】与裸鼠荷人成骨肉瘤骨髓腔原位移植模型应用范围相同。

【注意事项】动物年龄越小，其免疫功能越不健全，在理论上造模成功率就越高，但动物年龄太小（<2周龄），不能耐受手术损伤，移植后死亡率较高。

【模型评价】本模型的成功率较裸鼠荷瘤模型略低（80%~90%），但由于其实验周期短，动物成本低，便于管理饲养而被广泛应用。

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