ANEXT安龄生物·外泌体每周速递030
ANEXT安龄生物·外泌体每周速递030
1、仿病毒细胞纳米囊泡实现高效胞浆给药
纽州立宾汉姆顿大学万源教授团队前期研究发现，通过物理挤压细胞技术获得的纳米囊泡（CNV）可做为天然EV的替代。供体细胞经机械性挤压制备CNV的生产效率是EV的50-100倍，而生产成本不到EV的10%。该团队近期研究还发现CNV和EV的膜蛋白近似度超过70%，且CNV的批间变异可以限制在10%以内。以上研究提示CNV可作为EV替代品用于药物载体。
本研究中，该团队开发了对病毒进行仿生的CNV，即eFT-CNV（effective CNV）。研究人员先用CRISPR/CAS9将MHC-I和GPC3从HEK293细胞膜上敲除。MHC-I会递呈母细胞异常抗原，招致巨噬细胞的吞噬，敲除MHC-I可降低CNV的免疫原性。为避免因后续在细胞表面表达抗GPC3的scFV而产生CNV自聚体现象，导致可能的eFT-CNV收集失败，故敲除GPC3。进一步，用慢病毒感染细胞，使其依次表达抗GPC3的scFv和工程化的病毒膜融合蛋白。需注意的是，该工程化的膜融合蛋白不具备和靶分子结合的能力，但保留了促膜融合能力。其后，物理性挤压构建成功的HEK293细胞收获eFT-CNV。eFT-CNV通过抗GPC3的scFv结合至GPC3高表达肿瘤细胞表面，再由膜融合蛋白促发膜融合，从而完成肿瘤细胞胞浆内递药。
2、发现胶质瘤干细胞调控巨噬细胞极化新机制
近日，苏州大学附属第二医院神经外科董军教授团队在CNS Neuroscience & Therapeutics（中科院一区）上发表了题为“Exosomal miR-6733-5p mediates cross-talk between glioblastoma stem cells and macrophages and promotes glioblastoma multiform progression synergistically”的文章，该研究揭示了GSCs分泌的外泌体miR-6733-5p诱导巨噬细胞M2型极化，进一步提高了GSCs的自我更新能力和干性表达。
该研究确定了GSCs及其分泌的外泌体能诱导巨噬细胞M2型极化，极化后的M2巨噬细胞进一步提高了GSCs的自我更新能力和干性表达。鉴于外泌体已被证明可以运输miRNAs调控受体细胞功能，研究发现miR-6733-5p在胶质母细胞瘤患者的手术标本中富集，在GSCs衍生的外泌体中高度表达，并通过外泌体递送至巨噬细胞靶向IGF2BP3激活AKT信号通路从而介导M2型巨噬细胞的极化。这些数据表明，GSCs产生富含miR-6733-5p的外泌体，诱导巨噬细胞的M2型极化，以增强GSCs的干性并促进肿瘤的恶性进展。靶向外泌体miR-6733-5p可能提供一个潜在的对抗胶质母细胞瘤的新策略。
3、M2型巨噬细胞来源外泌体通过免疫调节促进糖尿病骨折愈合
近期，上海大学转化医学研究院苏佳灿教授团队在科爱出版创办的期刊 Bioactive Materials 上联合发表题为“M2 macrophage-derived exosomes promote diabetic fracture healing by acting as an immunomodulator”的研究论文，发现M2外泌体可作为一种免疫调节剂，通过激活M1型巨噬细胞中PI3K/AKT信号通路促进其向M2型巨噬细胞极化，改善骨免疫微环境，进而加速T2DM骨折愈合。
在这项研究中，作者首先提取了M2外泌体，并利用它们干预糖尿病骨折的骨修复。结果表明，M2外泌体通过降低M1型巨噬细胞比例进而调控骨免疫微环境，从而加速糖尿病骨折愈合。作者进一步证实M2外泌体通过激活PI3K/AKT信号通路诱导M1型巨噬细胞转化为M2型巨噬细胞。该研究为M2外泌体促进糖尿病骨折愈合提供了新的视角和潜在的治疗方法。
4、工程化细胞外囊泡通过PD-L1/PD-1轴改善1型糖尿病
近日，南开大学王悦冰团队在利用工程化MSC-EVs治疗T1D方面取得新进展，最新在国际权威学术期刊Small上发表题为“Engineered Cytokine-Primed Extracellular Vesicles with High PD-L1 Expression Ameliorate Type 1 Diabetes”的文章。该团队首次利用炎症因子赋能MSC-EVs后，通过负载FDA批准的小分子药物5-氨基乙酰丙酸己酯盐酸盐（HAL），实现了T1D成像治疗一体化。构建的H@TI-EVs长期治疗体系不仅在T1D小鼠中具有良好的损伤胰腺靶向能力，而且通过调控PD-L1/PD-1轴发挥优异的免疫抑制和治疗能力。
基于该课题组前期EVs的研究基础，针对MSC-EVs在T1D中体内动态变化不明、治疗效果偏低等问题，该团队提出利用炎症因子TNF-α和IFN-γ处理MSCs，触发其“短期记忆”效应，提高其分泌MSC-EVs的免疫抑制及损伤修复能力，再负载兼具成像和抗炎作用的小分子药物HAL，构建了工程化H@TI-EVs纳米体系。体外实验结果表明，H@TI-EVs具有更好的免疫抑制、抗炎和抗凋亡能力。在T1D小鼠体内，通过HAL分解产物原卟啉IX（PpIX）介导的荧光成像，研究者动态观察到H@TI-EVs特异性靶向损伤胰腺，在损伤胰岛聚集。在此基础上，分别对T1D小鼠进行长期（H@TI-EVs-l）和短期（H@TI-EVs-s）治疗，发现H@TI-EVs长期治疗组可以显著降低T1D小鼠的血糖水平，促进胰岛素的分泌，恢复T1D小鼠的血糖调节能力。进一步研究发现，H@TI-EVs-l通过调控PD-L1/PD-1信号通路抑制CD4+ T细胞活化，降低胰腺中T细胞的浸润水平。而且该纳米体系还有效降低了胰腺中巨噬细胞募集，并诱导巨噬细胞M1型到M2型的转变，有效重塑了免疫微环境。这项研究构建的工程化EVs体系易于制备，具有良好的生物安全性、相容性及治疗效果，为T1D的临床治疗提供了新思路及重要理论实验基础。
