N-3芘NEM标记巯基标记红细胞膜蛋白/DiD perchlorate（细胞膜红色荧光探针）的研究制备

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N-(3芘)马来酰亚胺(N-3芘 NEM)是一种特异标记蛋白质巯基的荧光探针,可通过荧光强度测定巯基含量.本文用不同浓度的高铁卟啉处理红细胞膜,再用N-3芘 NEM 标记,发现随浓度加大,巯基含量减少,与化学法测定结果一致,说明高铁卟啉可使膜蛋白巯基交联.用 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法做 N-3芘 NEM 标记的红细胞膜,通过荧光扫描确定 N-3芘 NEM 与红细胞膜区带1,2及3结合。

3.N-3芘 NEM 荧光探针标记红细胞膜分别取o.D 为0.1, 0.5,1.0及2.0高铁吓啉化合物0.5ml,用氮气吹干,加50pul甲醇溶解,然后分别加入2mg 蛋白/ ml 的红细胞膜0.5ml ,加0.5mg%的N-3芘NEM 2ml,以不加高铁叶琳化合物的红细胞膜为对照，37℃保温2小时,保温后用Hepes 缓冲液洗2次,在日立850荧光分光光度计上扫描。

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