【牛顿足迹】走进造血技术公司,攻克对PBMC细胞计数的难题
牛顿光学
智能成像,一步到位!

血细胞又称“血球”,是存在于血液中的细胞,能随血液的流动遍及全身。以哺乳动物来说,血球细胞主要含下列三个种类:红细胞、白细胞和血小板。其中白细胞主要扮演了免疫的角色。当病菌侵入人体时,白细胞能穿过毛细血管壁,集中到病菌入侵部位,将病菌包围后吞噬。

白细胞中包含外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell, PBMC)即外周血中具有单个核的细胞,包括淋巴细胞和单核细胞。其中淋巴细胞又包括NK细胞,T细胞以及B细胞等,这些细胞是先天免疫和适应性免疫系统的关键组成部分,可以保护身体免受病毒、细菌和寄生虫的感染和异物侵扰,并且能够消灭肿瘤细胞。PBMC是免疫学,感染性疾病,恶性血液疾病,疫苗开发以及移植免疫等领域学者经常需要的研究原材料。
PBMC的平均粒径相对来说都比较小,其中NK细胞是大淋巴细胞,平均直径为 12~15μm,T细胞直径为6~9μm,B细胞直径为8~12μm,单核细胞直径为12~20μm。
今天带大家走进福建某造血技术有限公司(以下简称造血公司),看看他们在日常工作中是如何使用牛顿光学的细胞计数仪CytoCube Auto来测试PBMC。
造血公司是一家由留学归国学者创办的,从事血液细胞分离、 培养及应用的国家高新技术企业。其围绕血液细胞形成了一条特色产品线包括:FLOSEP血液细胞分离技术;血液原代细胞库;血液细胞培养产品等,服务于基础研究,药物开发,细胞治疗工业以及医院等客户。


造血公司选用了性价比高的CytoCube Auto全自动便携高通量细胞计数仪。
1.利用仪器自带的自动调焦功能,辅助手动微调,将视图中细胞调节为中间透亮,边缘锐利状态。
2.考虑到PBMC粒径都比较小,从血液中分离出来后传代有限,不可避免的还带有细胞碎片和混杂了其它细胞,应用Cell gating技术将粒径范围设置为5-20μm。
3.通过与显微镜+血球计数板人工计数结果进行比对,将细胞阈值设定在30。
4.保存参数,并形成测试方案“PBMC”,后续每次测试只需要调用方案,一步完成。
5.对部分细胞样品进行台盼兰染色,形成蓝色背景,分析时采用明场模式计数。

依据上述步骤,造血公司实现了对pbmc的快速准确计数,不仅节约了宝贵的时间,更重要的是为后续实验提供了很好的数据支持。牛顿光学旨在为广大科研工作者提供更优质、便捷的实验方案,细胞计数,一步完成!