葡萄糖和 ATP测定丨艾美捷 Worthington葡萄糖-6-磷酸脱氢酶方案

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 (G6PD) 是一种调节酶，催化戊糖磷酸途径的步：使用 NADP +和/或 NAD +氧化葡萄糖-6-磷酸。

L. mesenteroides 的 G6PD 因其独特的双辅酶特异性而得到了非常详细的研究。大多数脱氢酶更喜欢 NAD +或 NADP +，但 L. mesenteroides G6PD 都可以使用。

艾美捷Worthington葡萄糖-6-磷酸脱氢酶特异性：

NAD 或 NADP 都可以作为辅酶，NAD 的内在反应速度大约是 NADP 的 1.8 倍（Olive 和 Levy 1967）。D-葡萄糖-6-磷酸被认为是天然底物，尽管 D-葡萄糖反应缓慢 (Metzger et al . 1972)。

Asp177 和 His240 形成 G6PD 的催化二元组。His240 作为从 6-磷酸葡萄糖中提取 C-1 质子的碱基；Asp177 稳定产生的正电荷 (Cosgrove et al . 1998)。

作品：

L.mesenteroides G6PD 是相同亚基的二聚体，每个二聚体有两个活性位点，假定位于辅酶结合位点和每个亚基中的大 β+α 结构域之间的口袋中（Rowland等， 1994）。这个口袋包含几个完全保守的氨基酸，包括一个八残基肽（Cosgrove et al . 1998）。

分子特征：

L. mesenteroides G6PD 基因编码 485 个氨基酸的多肽。G6PD 的独特之处在于它不含半胱氨酸残基。已经确定了在生理条件下仅使用NADP +的人和大肠杆菌的序列。Z. mobili的序列与L. mesenteroides一样可以使用 NADP +或 NAD +，也已确定。这些物种中的任何两个之间大约有 30-36% 的序列同一性。一个保守的序列从 Arg175 开始，并含有一个赖氨酸残基，被认为在葡萄糖-6-磷酸结合中起作用 (Lee et al . 1991)。

艾美捷Worthington葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的特性：

分子量：440,000 (Lee and Harpst 1973; 另见 Main et al . 1974)

组成：Lee 和 Harpst (1973) 指出 ButChE 是一种四聚体结构，具有相同大小的 110,000 道尔顿的亚基。它是一种糖蛋白。主要等人。(1974) 已经确定了氨基酸和碳水化合物的组成，基于 101,000 的颗粒重量。另见 Chiu等人。（1972 年）和帕夫利奇（1972 年）。

最佳 pH 值：6.0-8.0 (Augustinsson 1960)

消光系数：E 280 =13.6 (Main et al . 1974)

活化剂：Ca 2+和 Mg 2+ (Augustinsson 1960)

艾美捷Worthington葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的应用：

1.测量 NADPH 或 NADH 的系统（Bhattacharya 和 Ali 1988）

2.葡萄糖和 ATP（与 HK 偶联时）、果糖、6-磷酸葡萄糖、NAD(P) +和 CK的测定

相关文献：

1.Anderson, W. 和 Nordlie, R.： 酵母葡萄糖 6-脱氢酶的葡萄糖脱氢酶活性。I. 碳酸氢盐、磷酸盐和硫酸盐的选择性刺激 , Biochemistry 7 , 1479, 1968

2.Balaguer, P.、Terouanne, B.、Eliaou, J.、Humbert, M.、Boussioux, A. 和 Nicolas, J.： 使用葡萄糖 6-磷酸脱氢酶作为核酸杂交反应的新标记 ， 肛门生化 180 , 50, 1989

3.Ben-Bassat, A. 和 Goldberg, I.： 来自甲醇生长的假单胞菌 c.的葡萄糖 6-磷酸脱氢酶 (NADP + /NAD + ) 和 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶 (NADP +/ NAD + ) 的纯化和性质。 , Biochim Biophys Acta 611 , 1, 1980

Worthington主要研究覆盖生物技术和生命科学研究，诊断，生物制药和生物加工应用的高质量纯化酶，蛋白质，核酸和试剂盒。艾美捷科技是Worthington的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。