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BiogradeTech高活力牛凝血酶>2000IU/mg方案说明

2023-12-12 16:12 作者:艾美捷  | 我要投稿

凝血酶是由大小分别为31KD和6KD的两条肽链通过二硫键组成的一种丝氨酸蛋白水解酶,可从动物血浆中利用已激活凝血酶原水解制得,可催化纤维蛋白原(flbrinogen)水解释放A肽和B肽,由此形成纤维蛋白单体,单体进一步聚合,在血小板、红细胞和白细胞等参与下形成血凝块,常用于诊断学中凝血化验、凝血因子检测、血液或血浆的脱纤维化等;另外,由于凝血酶切割序列专一,水解效率高,因此在分子生物学、生物化学或生物工程制药研究中也常作为工具酶用于重组融合蛋白(包含凝血酶识别位点)的特异性断裂。   牛凝血酶(>2000IU/mg)凝血酶(Thrombin)来源于牛血浆,分子量37KD,是由两条肽链(31KD和6KD)通过二硫键组成的。   艾美捷牛凝血酶(>2000IU/mg): 目录号:A-CSH002 尺寸:1000U 储存:2-8°C(36个月) 分子量:37 kDa 外观:白色冻干粉或固体块 比活度:≥2000 |U/mg 纯度:SDS-PAGE分析中未观察到杂质带 pH(25℃):5.0~6.0  

 

牛凝血酶(>2000IU/mg)用法: 这种凝血酶是一种广泛应用的蛋白酶,可用于切割标签,并且可以高效地切割质量比低至1:2000的蛋白质。在20°C至37°C的温度范围内,切割时间为0.3至16小时。凝血酶的最佳切割位点是X4-X3-P-R[K]-X1'-X2',其中X4和X3是疏水性氨基酸,X1'和X2'是非酸性氨基酸。一些常用的识别位点包括L-V-P-R-G-S、L-V-P-R-G-F和M-Y-P-R-G-N。X4-X3-P-R-G-X2'之间的切割比X4-X3-P-K-L-X2'更有效。另一个识别位点是X2-R[K]-X1',其中X2或X1'是甘氨酸,比如A-R-G和G-K-A,切割发生在第二个残基之后。在凝血酶切割位点和N-末端标签之间插入五个甘氨酸残基可以改善切割效果。这种"甘氨酸连接肽"可使完全切割所需的酶量减少,并且还可以防止潜在的错误切割。有效的消化缓冲液是含有20 mM Tris-HCl缓冲液和150 mM氯化钠的pH 8.0的溶液。可以使用对氨基苯甲酰亚胺亲和纯化、苯甲酰亚胺亲和纯化或肝素亲和纯化去除切割产物中的凝血酶。   该试剂仅用于科学研究领域,不适用于临床诊断或其他用途。

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