文献参考！艾美捷pSMPUW-Neo慢病毒表达载体方案

基于人类免疫缺陷病毒-1（HIV-1）的慢病毒载体已成为一种有前景的载体用于基因转移研究。慢病毒载体的优点是具有基因转移和整合成分裂细胞和非分裂细胞。囊泡性口腔炎的假性包膜病毒包膜G（VSV-G）蛋白拓宽了靶细胞的范围。慢病毒载体已被证明将基因传递给神经元、淋巴细胞和巨噬细胞，这些细胞类型是以前的逆转录病毒载体所能做到的不得使用。慢病毒载体也已被证明在转导脑、肝、肌肉和没有毒性或免疫反应的体内视网膜。最近，慢病毒系统被广泛用于在体外和体内，siRNA在多种细胞系和原代细胞中有效整合。

慢病毒颗粒是由293T细胞通过瞬时转染编码用于病毒粒子的成分。由于对HIV-1的传染性的安全考虑慢病毒包装系统已经将病毒成分分离成3或4个质粒。然而，这些系统在重组时产生具有复制能力的慢病毒的机会仍然很小。此外，大多数商业慢病毒包装系统提供含有病毒结构的质粒预混合配方中的蛋白质，使得几乎不可能优化各种蛋白质的比例用于特定实验和宿主细胞的质粒。

艾美捷pSMPUW-Neo慢病毒表达载体#VPK-213在多重克隆前含有EF-1α启动子位点，其次是PGK启动子和新霉素抗性基因（图1）。

图1：pSMPUW新慢病毒表达载体（6352bp，卡那霉素抗性）。

pSMPUW-Neo慢病毒表达载体文献参考：

1. Chen, M. et al. (2002). Nature Genetics 32(4): 670-675.

2. Naldini, L., U. Blomer, P. Gallay, D. Ory, R. Mulligan, F. H. Gage, I. M. Verma, and D. Trono (1996)

Science 272:263-267.

3. Verma, I. M., and N. Somia (1997) Nature 389:239-242

4. Kahl C. A., Marsh J., Fyffe J., Sanders D. A., and K. Cornetta (2004) J Virol. 78:1421-30.

5. White S. M., Renda M., Nam N. Y., Klimatcheva E., Zhu Y., Fisk J., Halterman M., Rimel B. J.,

Federoff H., Pandya S., Rosenblatt J. D., and V. Planelles (1999) J Virol. 73:2832-40.

6. Kafri T., van Praag H., Ouyang L., Gage F. H., and I. M. Verma (1999) J Virol. 73:576-84.

pSMPUW-Neo慢病毒表达载体相关研究：

1. VPK-205: ViraSafe™ Lentiviral Packaging System, Ecotropic

2. VPK-206: ViraSafe™ Lentiviral Packaging System, Pantropic

3. VPK-107: QuickTiter™ Lentivirus Titer Kit (Lentivirus-Associated HIV p24)

4. LTV-200: ViraDuctin™ Lentivirus Transduction Kit