艾美捷Fluorochrome BrdU抗体（FC60001）的表征

概述：

这种抗体与合成胸苷类似物BrdU反应，当将其注射到动物在细胞周期的S期被整合到新合成的DNA链中积极增殖的细胞。存活的细胞数量可以通过免疫细胞化学。作为评估一组细胞增殖状态的杰出工具，它对药物发现研究至关重要，尤其是在癌症治疗和在ADME/Tox研究期间确定细胞的健康状况。BrdU Antibody-W是一种多克隆抗体在兔体内针对结合牛血清白蛋白（BSA）的BrdU培养。Fluorochrome的抗体用于大鼠脑组织的免疫细胞化学。。

艾美捷 BrdU抗体（FC60001）的表征：

A.齿状回BrdU阳性细胞（60X）成年大鼠注射BrdU。在共焦显微镜上拍摄的照片

B.齿状回B.BrdU阻滞

BrdU抗体（FC60001）基本参数：

中文名称：BrdU抗体

英文名字：BrdU Antibody -W

cat#：FC60001

规格：200ul

应用类型：IHC

免疫原：BrdU结合牛血清白蛋白（BSA）

来源宿主：兔

反应性：大鼠

保存建议：小瓶含有约200μl 1/100稀释液。 BrdU抗体-W可在BSA稀释剂（50 mM KPBS、0.4%Triton、1%BSA、1%NGS）中进一步稀释至至少1/30，000。n抗体应在-20 ℃下储存。 您将收到解冻的抗体。 除非你打算在48小时内使用，否则请重新冷冻。 避免多次重新冷冻抗体。n还包括吸附BrdU的滤纸，用于阻塞。 可向试管中加入500μl稀释抗体，以获得10 μM的组织块。 应用于组织前，在室温（RT）下孵育至少1小时。 该抗体特异性阻断BrdU，不阻断滤纸上吸附的其他肽。

通过进行阻断研究确定了特异性。从将先前注射BrdU的成年大鼠的海马与单独使用BrdU Antibody-W（A-60X）或与BrdU预孵育的BrdU Antibody-W一起使用（B-60X）。注意A中的标记和B中的标记缺失，表明抗体的特异性舞台调度。

BrdU抗体（FC60001）基本操作：

新鲜冷冻的10-30微米切片在室温下固定在4%多聚甲醛（FA）中1小时，在磷酸盐缓冲盐水（PBS）中洗涤，然后用50%甲酰胺/2X SSC（300mM氯化钠和30mM柠檬酸钠）在65C下搅拌2小时。切片按2X洗涤SSC，在37℃的2N HCL中孵育30分钟，然后直接置于100mM钠中硼酸盐（pH 8.5）在室温下10分钟。将切片在PBS中洗涤0.3%H2O2在PBS中10至30分钟。再次在PBS中洗涤组织，然后用Avidin/Biotin阻断试剂盒（Vector cat#SP-2001），用BSA稀释剂洗涤和孵育在室温下持续1小时。在室温下将BrdU Antibody-W（1/30000）应用于组织过夜。之后在PBS中洗涤，将切片在生物素化GAR中以1/1000（Vector labs-cat#BA1000）在RT孵育1小时，然后在Avidin/Biotin中以1/10000（Vector labs-cat#PK6100）在RT温育1小时（0.04%）在0.1M乙酸钠中与0.06%H2O2混合六分钟（2.5%氯化镍也可以添加）。然后对切片进行水洗（如果需要，进行复染）、脱水和盖子滑落。

文献：

Garcia-Fuster et al, in preparation: Individual differences in adult hippocampal neurogensis following experimenter administration of cocaine.