补体C5a(人)ELISA试剂盒,用于体外定量人C5a/C5a-desArg
补体系统是先天免疫的重要因素。在补体蛋白 5 (C5) 的补体激活过程中,C5 被蛋白水解裂解并产生过敏毒性肽 C5a。 C5a 是一种由 74 个氨基酸 (11kDa) 组成的小多肽,来源于 α 链的 N 末端。C5a本身的寿命非常短,在血清中被迅速裂解成更稳定,但在生物学上仍然活跃的C5a-desArg(也称为酰化刺激蛋白,ASP。因此,C5a-desArg 的测量可以得出有关测试样品中补体活化水平的可靠结论。为方便起见,以下文中将这两种形式称为C5a。 C5a 是一种有效的过敏毒素,可引起平滑肌收缩、血管舒张、血管通透性增加、嗜碱性粒细胞和肥大细胞脱颗粒以及溶酶体酶释放。此外,C5a 是嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞和单核细胞的有效趋化因子。 C5a 参与革兰氏阴性菌败血症、创伤、缺血性心脏病、透析后综合征和多种自身免疫性疾病中的炎症反应。C5a 升高与晚期动脉粥样硬化患者的心血管风险增加有关。此外,C5a与骨髓移植后白血病儿童的毛细血管渗漏综合征密切相关。C5a 也是尿液中用于预测肾移植后急性移植物排斥反应发作的标志物。 补体级联反应的活化产物含有单个天然成分中不存在的新表位。人 C5a ELISA 试剂盒基于一种捕获单克隆抗体,可识别 C5a-desArg 上的新表位。这可以防止与 C5 发生交叉反应。 艾美捷补体C5a(人)ELISA试剂盒基本参数: 类型:检测 量:1 x 96 度,2 x 96 度 标准范围:0.3 至 20 ng/ml 检测级别:0.3纳克/毫升 工作容积:100 μl/孔 物种:人 交叉反应性:马 - 不,老鼠 - 弱,猪 - 弱,兔子 - 弱,老鼠 - 弱 储存及稳定性:应储存在4°C。 在推荐的储存条件下,产品可稳定保存至少六个月。 疾病:传染病、肾脏病学
补体C5a(人)ELISA试剂盒的应用: 人 C5a ELISA 试剂盒用于体外定量测定血清和血浆中的人 C5a/C5a-desArg。
原则:
人 C5a ELISA 是一种基于夹心原理的即用型固相酶联免疫吸附测定法,工作时间为 3/2 小时。 8 块板和 5 个一次性 5 孔联排的高效形式允许自由选择检测的批次大小。 将样品和标准品在涂有识别人C450a的抗体的微量滴定孔中孵育。 生物素化示踪抗体将与捕获的人 C5a 结合。 链霉亲和素-过氧化物酶偶联物将与生物素化的示踪抗体结合。 链霉亲和素-过氧化物酶偶联物将与底物四甲基联苯胺 (TMB) 发生反应。 通过加入草酸来停止酶反应。 用分光光度计测量5nm处的吸光度。通过绘制吸光度(线性)与人C<>a标准品(log)的相应浓度的关系图来获得标准曲线。 与标准品同时运行的样品的人C<>a浓度可以从标准曲线中确定。
线性:
通过连续稀释含有 331 ng/ml 人 C5a 的样品来测定测定的线性。在测定中测量稀释的样品。该线的斜率为1.0907,相关系数为0.9988。
血浆 含有基线水平的人 C5a 的正常人血浆中加入人 C5a,浓度为 10 和 2.5 ng/ml。将含有和不含人 C5a 的样品在 1°C 下孵育 37 小时。 使用ELISA测量样品。人C5a的回收率在100%至113%之间。血清含有基线水平的人 C5a 的正常人血清中加入浓度为 5 和 10.2 ng/ml 的人 C5a。将含有和不含人 C5a 的样品在 1°C 下孵育 37 小时。 使用ELISA测量样品。人C5a的回收率在89%至102%之间。活化血清含有人 C5a 基线水平的正常活化人血清与人 C5a 一起加标,浓度分别为 10 和 2.5 ng/ml。将含有和不含人 C5a 的样品在 1°C 下孵育 37 小时。 使用ELISA测量样品。人C5a的回收率在99%至108%之间。
该试剂仅用于科学研究领域,不适用于临床诊断或其他用途。