肿瘤浸润B细胞与三级淋巴结构 (TLS)

文盲研究生的一篇简单的笔记，基于并不多的文献阅读。

在肿瘤免疫领域，学界一直关注比较多的是T细胞。但近几年的一些发现揭示了肿瘤组织中的B细胞对预后以及ICB治疗的响应都是有影响的。

一般认为B细胞通过两种途径抗肿瘤：一是体液免疫，即分泌抗体，然后通过ADCC或CDC途径清除肿瘤细胞。但这一过程并不是抗体结合了肿瘤细胞就完事了的，之后还需要巨噬细胞（肿瘤免疫中的著名二五仔）等吞噬肿瘤细胞，而肿瘤细胞往往会逃逸这个过程。所以之前很长一段时间认为抗肿瘤免疫中T细胞介导的细胞免疫比体液免疫更重要。二是辅助T细胞响应，B细胞有抗原呈递功能，它可能会激活TH1细胞来激活CD8+T细胞，或者少数情况下直接激活CD8+T细胞，来增强细胞免疫的效果。

B细胞进入肿瘤组织一般是依靠CXCL13。CXCL13的中文翻译也叫B细胞趋化因子，顾名思义，它是专门用来吸引B细胞的细胞因子。B细胞表面表达的CXCR5是CXCL13的配体。肿瘤组织中CXCL13一般由DC，单核细胞，CD4+/CD8+T细胞分泌，以及Tfh（滤泡辅助T细胞）和FDC（滤泡树突细胞）。

后两种细胞中，字母F都是follicular（滤泡）的缩写。滤泡是淋巴组织中的结构，也叫做淋巴小结，Tfh和FDC也是常见于淋巴组织的细胞。那么它们为什么会出现在肿瘤中呢？说到这里其实就暗示了肿瘤中也存在淋巴结构，即三级淋巴结构 (tertiary lymphatic structures, TLSs)。

TLS在正常生理条件下是不会出现的，只有在慢性炎症条件下才会出现。比如肿瘤，自身免疫病、异体移植等。目前文献已经报导的病人体内发现TLS的肿瘤种类有：黑色素瘤，非小细胞肺癌，结直肠癌，卵巢癌。

说到三级，必然想到一级和二级。苯人外行，没有正经修过免疫学，所以查了一下：一级 (primary) 淋巴器官也叫中枢淋巴器官，即胸腺和骨髓，分别是T细胞和B细胞发育成熟的场所。二级 (secondary) 淋巴组织 (SLO) 包括脾脏、扁桃体、阑尾、Peyer's patches，和广泛分布的淋巴结。

我们可以直观地看到淋巴结里有B细胞和T细胞各自专门的区域。我揣摩了一会，觉得TLS这样被命名是因为，学界认为必须T细胞和B细胞各自有各自的区域，层次非常清晰（类似于淋巴结等淋巴组织），才能算作一个成熟的TLS；不然就是不成熟的，或者根本不能算作TLS，只不过是一团混乱地夹杂的T细胞和B细胞而已。

TLS的结构特征是内层CD20+B细胞被CD3+T细胞包围，类似于SLO。T细胞中，Tfh占主要，也可能有CTL、TH1和Treg。

在右边这种状况下，B细胞就能很好地行使上一张讲过的辅助细胞免疫的作用，将抗原呈递给T细胞，T细胞进行杀伤；B细胞自己也分泌抗体行使体液免疫。研究也发现成熟或不成熟的TLS里B细胞和T细胞的状态是有所不同的。成熟TLS里T细胞活性比较高，不成熟TLS中就比较低，目前也认为T细胞活性是吸引B细胞来到肿瘤并形成TLS的起始的决定因素。

TLS更完备的形态是不仅有区域分明的T细胞和B细胞，还有很多淋巴结里有的细胞和组织，比如非常重要的Tfh（刺激B细胞增殖），DC，FDC（提呈抗原使naïve B细胞激活、分泌CXCL13和其他促进B细胞成熟的细胞因子），FRC（成纤维网状细胞，形成了淋巴组织内部的通道），HEV（高内皮细胞微静脉，即淋巴结中B细胞进入的通道，HEV形成显然使B细胞更容易进入肿瘤），这样TLS俨然一个驻扎在肿瘤里面的小型的淋巴结。也有文章比较严格地定义道，必须有这些细胞和HEV才能叫做TLS。

目前认为T细胞和髓系细胞（主要是DC）是TLS的形成的先决条件，因为在TLS里都检测到了这两种细胞，没有不存在的情况。至于具体是怎么促进TLS的，还没有系统的研究。事实上，有发现CD4+或CD8+T细胞在耗竭时会分泌CXCL13，就仿佛它自己快不行了，喊B细胞来支援。

有些TLS会发展类似生发中心 (germinal centre) 的结构。B细胞在淋巴结中被抗原激活后进入生发中心，发生生发中心反应，作用是筛选出能分泌高亲和力抗体的B细胞（不再分泌低亲和力的IgM和IgD，而是高亲和力的IgG）。所以如果肿瘤内部有个生发中心，体液免疫会增强很多。

不像其他淋巴组织，TLS是没有包膜的。这使得它包含的免疫细胞很容易进入到周围组织，譬如说肿瘤中形成了TLS，那么这个肿瘤的免疫细胞浸润程度很可能高于别的没有TLS的肿瘤。但另一方面，这也造成这些免疫细胞一直暴露在炎症环境的各种分子之下，这有可能对免疫细胞的功能造成影响，比如它们可能更容易耗竭。