EvaGreen染料——定量实时PCR的重要作用
EvaGreen 染料是一种绿色荧光核酸染料,其特征使得该染料可用于多种应用,包括qPCR和DNA熔解曲线分析、嗜热解旋酶依赖性扩增(tHDA)的实时监测和毛细管凝胶电泳。染料本身基本上是非荧光的,但在与dsDNA结合时变得高度荧光。DNA结合的染料具有与荧光素(FAM)或SYBR非常接近的激发和发射光谱 绿色I,使其易于与配备有488 nm氩激光器或具有该区域波长的任何可见光激发的仪器兼容。
艾美捷EvaGreen#31000染料在热和水解方面都非常稳定,在常规处理过程中提供了便利。EvaGreen 与SYBR不同,染料不渗透细胞膜,因此无致突变性和细胞毒性 绿色I,它迅速进入细胞,是一种强大的突变增强剂。
EvaGreen的独特性能 染料使其在定量实时PCR(qPCR)应用中特别有用。与广泛使用的SYBR相比 绿色I,EvaGreen 染料通常对PCR的抑制性较小,并且不太可能引起非特异性扩增。因此,EvaGreen 染料可以以比SYBR高得多的染料浓度使用 绿色I,产生用于液滴数字PCR、实时PCR和熔解曲线分析的高分辨率信号。
EvaGreen qPCR主混合液,用于灵敏、价格有竞争力的qPCR试剂。Biotium还有噻唑绿色,1000 X的DMSO溶液。
EvaGreen特点:
低PCR抑制:显示出比SYBR低得多的PCR抑制 绿色I通过智能“按需释放”DNA结合技术
高灵敏度:染料的低PCR抑制允许较高的染料浓度用于大得多的qPCR和熔解曲线分析信号
无致突变性和无细胞毒性:标准艾姆斯试验无致突变性和细胞毒性; 完全不透细胞膜 与快速PCR方案兼容 对PCR的最小干扰使得可以显著缩短链延伸时间
与多重PCR兼容:当以推荐浓度使用时,扩增子之间无染料迁移
优质的热稳定性、化学稳定性和光稳定性:在PCR缓冲液中在95-100°C下持续48小时没有可检测的染料分解; 在碱性或酸性条件下高度稳定; 可承受反复冻融循环
光谱与SYBR相似 绿色岛:兼容所有主要品牌的qPCR仪器和酶系统
EvaGreen属性:
探测细胞定位:PCR/qPCR, HRM
对于活细胞或固定细胞:500/530 nm(含 DNA)
检测类型/选项:20X(25 微米)
细胞渗透性:储存在 -10 至 -35 °C