徒手切片:制备双子叶植物叶片横切面（切片过程具有一定的危险性，儿童请勿模仿，未成

利用徒手切片技术来制备和观察双子叶植物叶片的显微结构

1.材料的选取

• 披针形的夹竹桃叶片和椭圆形的榕树叶片

夹竹桃是观察旱生植物叶片结构的代表， 但需注意其有毒！

• 选成熟定型的老叶片

why：内部结构组成稳定、清晰，也比较好切。

2.切片部位的选取

取叶片长轴的中段偏靠叶基的区域，要“过中脉留两翼”——选中脉以及中脉左右两侧的叶肉。

why：为了观察到植物叶片的三种基本结构：表皮、叶肉、叶脉

3.切片取材部位的大小

长度2-3cm，“过中脉留两翼”的整体宽度约0.5cm。

4.切片过程示范

①用双面刀片（up用的是首马牌 ，TB同款已下架）切取夹竹桃叶片长轴中段偏靠基部部位

②切掉中脉左右两侧多余的叶片，仅留取中脉左右两翼，使中脉及两翼的整体宽度约为0.5cm

榕树叶片跟夹竹桃叶片的切法一样，略。

③将切好的材料握在手上。

用手拿材料时，

• 材料的近轴面（即上表皮）要紧靠食指的第一指节。
• 材料的切面要与食指第一指节的皮肤相平或略低0.1mm（切勿：材料的切面高于食指第一指节皮肤）。
• 夹持材料的拇指应低于材料切面约0.3mm，且拇指绝不能屈指。

why：中脉左右两翼的叶片往往会微微向叶片近轴面上翘。

④将刀片和材料用水润湿

⑤切片核心过程

刀片架在食指第一指节皮肤上，调节刀锋与材料切面相平于同一水平线

切片时手腕不动，手臂带动刀片进行拉切，拉切方向是从左上角到右下角。

反复多切几片。胆大心细，姿势到位，一气呵成。

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提示：

• 徒手切片初学者，起初切速不要过快，先要练习、掌握刀片的持法和切法。熟练后，再提速！
• 快速能避免、减少切片厚薄不均的情况
• 操作者跟观看者感受是不一样的。只要操作标准，一切安全都在操作者的掌控之中，没有观看者认为的那么危险。

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⑥将切下来的切片抖落在培养皿里的水中。

⑦用毛笔轻轻的将材料捞起，转移至事先准备好的载玻片上的水滴中，再盖上盖玻片制成临时装片

⑧进行镜检观察

⑨榕树叶片横切面的显微镜观察结果

夹竹桃叶片横切的显微观察在后期视频

评论区Q&A总结：

Q：烟草类柔软而且薄的叶片如何切呢，每次切都会变形，只能垫桌子上？

A：纸质叶片很难切，可卷成一个圆柱再切

Q；小麦玉米等颗粒固体物的切片需要怎么制作

A：胚乳不好切，如果切实需要还得石蜡切片法比较靠谱，也可蓖麻种子胚乳细胞的切片方法（参见往期视频）

Q：沉水植物等软的叶子怎么切

A1：用夹持物，比如胡萝卜，土豆，但是效果不佳，最好用的是:南方用凤眼莲的叶柄，北方用通草。

A2：或者琼脂糖包埋。4%低熔点琼脂糖。 ——太软，易碎？

Q：切了一小时叶表面扒不下来？

A：叶片表面用刀片刮

Q：切过番茄果实切片吗

A：没切过，不过做过番茄离散细胞，很经典的实验结果，往期视频里面有