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艾美捷西部转移研究丨G-Biosciences 三部曲全方案

2022-07-15 14:44 作者:艾美捷  | 我要投稿

蛋白质印迹法或蛋白质印迹法涉及将蛋白质从聚丙烯酰胺凝胶转移到 PVDF 或硝酸纤维素膜上,以便通过特异性抗体进行检测。艾美捷 G-Biosciences 为整个 Western 转移过程提供高质量的试剂和资源,以确保成功转移和清洁蛋白质检测。

 

部曲:蛋白质转移

对于初始转移,艾美捷 G-Biosciences 具有高蛋白结合膜(聚偏氟乙烯和硝酸纤维素) 和高效率西部转移缓冲液,包括专为高分子量蛋白质转移. 蛋白质转移后,强烈建议使用快速且可逆的蛋白质染色剂检查蛋白质转移效率,例如Swift™ 膜染色剂或者BLOT-FastStain™. 对于改进的蛋白质转移或难以转移的蛋白质,例如高分子量蛋白质,G-Biosciences西部转移垫以提高传输效率。

 

第二部曲:蛋白质印迹

对于探测蛋白质转移膜,步是用适当的封闭剂封闭非特异性结合位点。G-Biosciences 提供一整套封闭剂,包括非动物蛋白阻断剂(午睡阻隔™或者Protein-Free™ 封闭剂)、非血清动物蛋白阻断剂(Superior™ 封闭剂或者FISH-Blocker™, 和标准阻塞解决方案使用牛奶,酪蛋白或者牛血清白蛋白. 一个方便封闭剂试用包提供以确定要使用的J佳封闭剂。

 

一旦膜被封闭,就会添加选择的一抗。G-Biosciences 提供超过 21,000 种一抗所有这些都可以直接与 HRP 或其他检测探针结合。或者,一个二抗偶联辣根过氧化物酶 (HRP) 或碱性磷酸酶 (AP) 可用于检测一抗。一抗和二抗孵育后,需要用洗涤缓冲液彻底清洗膜(TBS-Tween 或 PBS-Tween)。

 

第三部曲:蛋白质检测

最后一步是蛋白质检测,检测探针通过化学发光或者显色反应。G-Biosciences femtoLUCENT™ PLUS和picoLUCENT™ PLUS是 HRP 和 AP 的高灵敏度化学发光试剂,而femtoCHROMO™-AP和femtoCHROMO™-HRP允许对蛋白质进行显色检测。

 

艾美捷 G-Biosciences Western ReProbe™允许用户剥离印迹并用不同的抗体重新探测,例如管家抗体,以及Swift™ 薄膜清洁剂有助于清洁斑点和曝光过度的胶片。

G-Biosciences专注于蛋白质组学研究,广泛应用于学术研究和工业制造领域,包括:蛋白质检测、样品制备、电泳、蛋白质印迹、质谱、测定开发、抗体生产和蛋白质纯化等。艾美捷科技是G-Biosciences的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。


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