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质谱流式应用文章分析——神经免疫:神经发育过程-百泰派克生物科技BTP

2023-06-09 17:54 作者:百泰派克生物科技  | 我要投稿

质谱流式技术(Mass Cytometry)在药物开发和生物制品表征中的潜力巨大。质谱流式细胞术将质谱技术与流式细胞仪相结合,能够实现对单个细胞的生化成分进行深入研究,帮助我们理解疾病机制,验证药物的效果,发现新的药物靶点以及增强生物制药质量控制。这在生物药物表征中非常有用,它可以帮助解决以下一些问题:


单细胞层次的分子表征:传统的质谱技术通常需要大量的样本以获取可靠的结果,而质谱流式技术则可以分析单个细胞的生化成分,这可以帮助我们更深入地理解细胞的生物学特性。

生物分子的定量分析:质谱流式技术可以对细胞内的生物分子进行定量分析,包括蛋白质、代谢物和其他生物分子。

细胞异质性的研究:细胞群体中的细胞并非完全相同,它们之间的差异可能影响疾病的发展和治疗的效果。质谱流式技术可以帮助我们研究这种细胞异质性。


百泰派克生物科技BTP采用基于Fluidigm Helios流式细胞仪(Mass Cytometry System for Single Cell Analysis)用于单细胞质谱分析,该平台能够完成包括单细胞捕获、cDNA合成、实时定量PCR分析、目标区域扩增以及质谱流式细胞分析。


免疫细胞包括多样化的细胞亚群,它们通过细胞因子介导的互作和直接的细胞-细胞相互作用,与其他免疫和非免疫细胞协同行使生物学功能。大脑由影响大脑发育、组织平衡和神经元活动的常驻和浸润免疫细胞组成。中枢神经系统(CNS)紊乱会引发广泛的疾病,包括情绪障碍、脑血管疾病、多动症和自闭症等神经发育疾病,焦虑抑郁、精神错乱、成瘾等精神类疾病,阿尔茨海默(AD)、帕金森(PD)、亨廷顿病(HD)等神经退行性疾病。而这些严重危害人类健康,造成沉重的社会负担。越来越多的证据表明,免疫系统在中枢神经系统发育和功能中的作用(图1)。因此,免疫调节作为治疗中枢神经系统紊乱疾病的一种治疗策略,已经得到越来越多的关注。


图1. 质谱流式细胞术免疫系统在中枢神经系统的作用


质谱流式技术可以对复杂的免疫网络中的其单个细胞成分进行描述,该技术的出现使得对大脑的高维分析成为可能,从而使人们对神经-免疫相互作用的理解达到新的水平。


人类神经系统发育的主要程序包括诱导及原始神经胚形成(发生高峰于妊娠3~4周)、前脑发育(发生高峰于妊娠2~3个月)、神经细胞增殖、移行与分化(发生高峰于妊娠3~5个月)突触连结及神经回路建立、树突发芽、膜兴奋性形成的发生高峰于妊娠5个月至出生后数年;神经髓鞘化的发生高峰在出生至出生后8个月左右。利用模式动物阐明神经发育生物学中存在的基础性关键问题是现代生命科学研究的重要任务。


位于背根神经节 (DRG) 中的躯体感觉神经元将各种感觉刺激传递到中枢神经系统 (CNS),包括机械压力、肢体位置变化、温度、疼痛和瘙痒。有研究开发了一个41抗体组合,包括关键转录因子,神经营养因子受体和其他已知在DRG细胞类型的规范和成熟中起关键作用的蛋白质标志物用于研究背根神经节的发育。


图5.质谱流式细胞术用于分析背根神经节发育


该研究对C57/BL6小鼠的背根神经节进行了单细胞质谱流式分析,鉴定并量化了DRG中胚胎和出生后发育中30种分子不同的体感神经胶质细胞和41种躯体感觉神经元亚型的丰度。对分化轨迹的分析显示,罕见的细胞共同表达两个或更多的Trk受体,并过度表达干细胞标志物,这表明这些神经营养因子受体在细胞命运规范中发挥了作用(图5)。

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