lightcycler的使用
2023-07-14 22:30 作者:bili18115828291 | 我要投稿
染料
+：添加程序
预变性-两步法-溶解曲线-冷却
设定两步法温度，根据引物tm，不高就55-60°C 即target
溶解曲线可预实验
操作注意：
加样数不足96孔，放中间（有热盖）
样品编辑：
制作标曲，需要两对引物—内参基因+目的基因
type-standard标准品，制作标曲
逆转录的cdna梯度稀释，引物在不同模板浓度下扩增
阴性对照：只有水
内参：reference
分析——两条标曲
扩增效率：一个模板经过一个循环变成1-1.5
扩增效率大ct值小
ct体现的扩增效率的区别，
扩增曲线（梯度稀释曲线为间隔开的）
相对定量模板
内参ct值比较小
