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YADA荧光探针;活细菌中肽聚糖标记

2022-11-28 15:11 作者:biofount科研试剂  | 我要投稿

YADA是一种绿黄色荧光黄基荧光D-氨基酸。 适用于标记活细菌中的肽聚糖。 在合成过程中掺入细菌细胞壁。 表现出比其他 FDAA 大的斯托克斯位移和更宽的发射光谱,允许通过紫色光源激发并使用绿色滤光片检测。 显示出良好的水溶性、光稳定性和热稳定性。 激发/发射 λ ~426/535 nm。

YADA性质

M.Wt:459.41

Formula:C15H13N3O10S2

Solubility:Soluble to 100 mM in DMSO

Storage:Store at -20°C

CAS No:1471982-33-8

图1:YADA光谱

制备储备液 for YADA

以下数据基于产品分子量 459.41。由于水合程度的不同,批次的特定分子量可能因批次而异,这将影响制备储备溶液所需的溶剂体积。选择批次从而根据批次分子量重新计算: 

图2:不同浓度YADA储备液配制

YADA使用案例

图3:分裂和伸长过程中细胞壁合成和水解率的 FDAA 测定。 (A) 为脉冲追踪实验观察到的标记模式的示意图。新细胞壁材料用 HADA(蓝色)标记,而旧材料用 YADA(黄色)染色。 (B) 用 HADA 脉冲 2、4 和 8 分钟后指示菌株的代表性图像。在新 (C) 和旧 (D) PG 的分裂部位区域测量并归一化综合荧光强度。从这些强度测量中得出积分可得出 sPG 合成速率。数据符合二次指数方程(R 平方 > 0.9)。 (E) 隔膜 PG 水解率来自计算 YADA 荧光强度随时间的减少,与追踪前固定的细胞相比(时间点 0 分钟,D)。 (F) 由于较早时间点的低信号强度,8 分钟后测量了新细胞壁材料的侧壁掺入(HADA 荧光强度)。 (G) sPG 和侧壁合成之间的比率是通过除以 8 分钟脉冲后每个的平均 HADA 荧光强度来计算的。所有数据均表示为平均荧光强度。误差线表示 95% 的置信区间。所有值都是任意荧光强度单位,并除以 1000 用于绘图目的。 (A) 中的比例尺 = 2 µm。

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