DAPI溶液（介绍,溶液配制,使用步骤）

DAPI 产品介绍：

DAPI (28718-90-3,DAPI Dihydrochloride)是一种荧光 DNA 染料，可与双链 DNA 的小沟结合，优先选择富含腺嘌呤和胸腺嘧啶 (AT) 的 DNA。 DAPI 常用于显微镜和流式细胞术。 DAPI 可用于固定细胞或活细胞，尽管它在活细胞中的跨膜效率较低并且需要使用更高的浓度。采用DAPI配制 DAPI染色液：浓度为5 mg/ml，推荐工作浓度为0.5-10μg/ml。

DAPI溶解度

DMF溶液: 0.2 mg/ml

DMSO溶液: 3 mg/ml

Ethanol溶液: 0.2 mg/ml

DAPI溶液配制：

a. 取1mg的DAPI粉末，离心使粉末沉积在保存管底，后取1mL 的ddH2O将 DAPI粉末溶解，可以制备出 2.9mM的DAPI溶液（1mgDAPI/1mL H2O）。 备注： 不使用的制备液需要按照每次试验需求量分装存储，以免反复冻融对试剂活性造成影响；DAPI 不可以用 PBS缓冲溶液或者其他缓冲液直接进行溶解，需要先用水将其溶解。 
b. 取需要量的 DAPI溶液 加入 PBS缓冲液中，制得 10~50µM的 DAPI溶液。
※ 可选择采用以下方法配制 PBS缓冲液： 称取：8.00g NaCl，0.20g KCl，0.2g KH2PO4以及2.9g Na2HPO4·12H2O，溶于1L纯水中制得。 

DAPI溶液使用步骤：

a. 量取 1/10培养基体积 的 DAPI溶液 加至细胞培养基里，当然也可采取 1/10浓度 的 DAPI缓冲液 替代培养基。
b. 在37℃恒温条件下，培养细胞约10~20分钟，可根据实验调节培养时间。
c. 之后再用 PBS缓冲液 或其他 适合的缓冲液 对细胞清洗2-3次。
d. 最后使用荧光显微镜进行观察细胞，荧光显微镜需带有 360nm激发波长和460nm发射波长的滤光片的。