动物细胞培养 【选必三】|0基础救星！

自己从书上摘抄的笔记，希望对你们也有点用处。

1、细胞贴壁与接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。当细胞贴壁分裂生长到表面相互接触时，细胞就停止分裂增殖，这种现象称为接触抑制。

先有“细胞贴壁”再有“接触抑制”

2、原代培养与传代培养：

原代培养：动物组织消化后的初次培养称为原代培养，原代培养的细胞核型正常。

传代培养：贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。这样培养的过程通常被称为传代培养。一般情况下，细胞在传至10~50代作业时，增殖会逐渐缓慢，以至于完全停止，这时部分细胞的细胞核型可能会发生变化。

3、由于能保持正常的二倍体核型，供体细胞一般选用传代培养十代以内的细胞。

4、动物组织培养:

过程：取动物组织块剪碎，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞后放入适宜培养液形成细胞悬液后让细胞增殖进行原代培养或传代培养。

5、动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成为动物体。

6、动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。

诱导方法：生物诱导方法（灭活的病毒），化学诱导方法（聚乙二醇），物理诱导方法（电激法）

7、当原代培养中细胞不能增殖时，可以分装到新的培养瓶中进行传代培养，使其继续增殖。

8.动物细胞培养

原理：细胞增殖

过程：

培养条件：

a.无菌无毒的环境：对培养液和所有培养用具进行无菌处理；添加一定的抗生素；定期更换培养液以清除代谢产物。

b.营养：除正常的有机和无机营养外，还需加入血浆，血清等一些天然成分。（原因：人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚加入血清能使动物细胞正常生长增殖）

c.温度和PH:适宜温度为36.5摄氏度左右（哺乳动物）；ph为7.2~7.4（多数细胞）

d.气体环境：95%空气和5%PH（维持营养液PH）

9.胚胎干细胞：

哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。

在形态上，表现为体积小，细胞核大核仁明显

在功能上，具有发育的全能性

意义：ES细胞的分离和培养成功是胚胎工程中的重大成就之一

10.ES细胞在体外培养的条件下，能够维持不分化的状态

11.在培养液中加入分化诱导因子，如：牛磺酸，丁酰环腺苷酸等化学物质时就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化

12.获能的精子和培养成熟的卵子，一般情况下都可以在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程

13.饲养层细胞一般为输卵管上皮细胞，在干细胞培养时，可作为提供干细胞分裂、增殖的营养细胞

14.应用：