细胞介绍

源自一只患有恶性组织细胞增生症的十岁雄性金毛猎犬。DH82细胞具有类似巨噬细胞形态，并能吞噬乳胶颗粒。DH82细胞具有Fc-γ受体阳性，Fc-μ和C3b受体阴性；DH82细胞不生成IL-1。

基本信息

细胞别称：DH-82;DH 82

细胞来源：恶性组织细胞增生

细胞形态：巨噬细胞样

生长特性：贴壁生长

安全等级：BSL1

包装规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

推荐换液：2~3次/周

传代比例：1:3-1:4

倍增时间：~26 hours

保藏机构：ATCC;CRL-10389

培养保存

培养体系：EMEM(MEM+NEAA)+15% FBS(Heat Inactivated)

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%；温度：37℃

冻存条件：基础培养基+5%DMSO+40%FBS(TS500)，液氮保存

传代步骤

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次；

2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化；

3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀；

4. 收到细胞后首次传代推荐将细胞悬液按1：2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中，建议冻存一支备用，后续传代根据实际情况按1:2到1:4的比例进行。

冻存步骤

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入1ml含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数；

2. 4min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和DMSO，轻轻混匀，DMSO终浓度为10%，细胞密度不低于1x10(6)/ml，每支冻存管冻存1ml细胞悬液，注意冻存管做好标识；

3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

细胞用途

仅供科研使用。