高效培养BT-474细胞，这篇笔记一定不能错过

BT-474细胞是人类乳腺癌细胞株，来源于一名乳腺癌患者的肿瘤组织。该细胞株最初于1975年由美国国立癌症研究所（NCI）的Brugge等人分离和培养，属于一种激素受体阳性的HER2过表达的乳腺癌细胞株。

种属 ：人

性别/年龄 ：女/60岁

组织 :乳腺；乳房/导管

疾病:导管癌

培养条件:95%空气，5%二氧化碳；37℃

BT-474细胞培养4倍成像

BT-474细胞培养方法

1.细胞的准备与分离

首先，在开始培养BT-474细胞之前，需要准备足够数量的种子细胞。可以从细胞库中购买现成的BT-474细胞，或者用其他细胞培养技术来培养和分离出BT-474细胞。

对于BT-474细胞的分离，最常见的方法是通过酶消化来将细胞从培养皿上分离出来。建议使用0.25％胰酶和0.02％EDTA来消化细胞，约需消化15-30分钟。处理完后，将细胞转移到适当培养皿中。

2.培养基与温度

接下来，将准备好的分离细胞加入到含有经过灭菌处理的培养基的培养皿中。我们推荐使用DMEM/F12培养基来培养BT-474细胞。此外，还可以添加FBS（胎牛血清）或其他适当的添加剂（如基质粘附因子，细胞因子等）来增强BT-474细胞的生长。

为了保持BT-474细胞的健康和快速增殖，可以将细胞培养在恒定的37℃和5％CO2的条件下。使用恒温箱或培养箱来保持培养皿内恒定的温度和气氛环境。

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3.传代

当BT-474细胞培养达到80％-90％的密度时，即表现出较高的细胞增殖速率时，需要进行传代。传代操作旨在拆解成熟的细胞集合并将其重新分离，从而实现种子细胞的扩张。

对于BT-474细胞的传代，可以使用同样的酶消化方法，将细胞从培养皿上分离出来，再种植到新的培养皿中，并添加新的培养基。传代次数应注意控制，过多次传代会导致细胞形态和生长特性发生变化，影响实验结果的准确性。

4.微镜下的观察

细胞的形态是细胞生物学研究中的重要指标之一。为了确保BT-474细胞在培养过程中的健康状态，建议每天进行显微镜下的观察，注意观察细胞的生长状态和细胞形态变化。

BT-474细胞培养显微镜下20倍成像

5.注意事项

1. 细胞培养条件要控制好，保持适当的CO2浓度和温度，避免细胞过度密集。

2. 细胞传代次数不宜过多，一般传代3-4次即可。

3. 实验过程中要注意无菌操作，避免细胞污染和交叉感染。