AAV在心血管系统的给药方式
AAV是将靶基因运送至体内的重要载体之一，合适的给药方法能够实现靶基因在特定组织器官的高表达。本文将详细介绍AAV在心血管系统的给药方式，另外小编还找到了教学视频，小伙伴可以将视频网址复制到浏览器中观看学习哦~
心肌原位注射操作步骤[1-2]
1、小鼠麻醉固定在手术台上，剪除颈部和胸部被毛，使用酒精消毒手术区域。
2、光纤灯照射到颈部进行食管照明，插入气管，将管道连接到呼吸机上（95% O2/5% CO2），以恒定正压通气（TOPO呼吸机：呼吸频率125次/分；吸气压力峰值10-12 cmH2O），需要根据呼吸机使用指南和小鼠状态调节。
3、用镊子将皮肤向上拉离胸部，用无菌手术刀刀片在与胸骨平行的皮肤上做一个1.5cm的切口。
4、使用微型剪刀在肋间肌上开一个小洞，剪断第三个肋骨，显露胸膜。
5、用钳将心包从心脏上拉开，用齿形钳轻轻撕开，显露心脏。必要时可于左外侧垫纱布隔开左肺。
6、在心肌表面注射病毒，可以以心脏长轴距离心尖0.5 mm处为中心，在其上下左右2 mm处分四点于心肌内注射病毒，注射成功后可见局部颜色由红色转为白色，也可以根据想要标记的肌肉大小进行调整，一般都选择多点注射病毒，病毒扩散效果比较好。病毒注射以后，探查无出血后关胸，注意勿缝到心肺及血管。在缝合过程中胸腔留置吸引管一根，其他部分的肌肉皮肤进行逐层缝合。
7、在缝合完毕以后，针筒抽吸胸腔积气积液。
8、小鼠苏醒后，待其状态良好，拔除气管插管，停止人工呼吸，清除气道血块及分泌物，进行一针缝合气管及肌肉切口。
9、在小鼠背部皮下间隙注射0.5ml温无菌生理盐水，将小鼠置于笼内暖垫上，直至小鼠恢复活动能力。
视频教程：
https://www.jove.com/cn/t/2581/coronary-artery-ligation-intramyocardial-injection-murine-model
尾静脉注射操作步骤[3]
1、固定小鼠，仅使小鼠的身体固定，无需麻醉。可以使用专用的小鼠固定器，也可以用离心管甚至烧杯代替。
2、注射前首先要让小鼠的血管充盈。可以采用75%的酒精棉球擦拭的方法或者采用温水浸泡的方法。若小鼠的血管不清楚，推荐采用温水浸泡的方法，水温以不烫手为宜。温水浸泡2～3分钟后，取出小鼠尾巴，用干棉球擦拭。
3、小鼠尾部共有四条血管，一般认为左右的两条静脉比较容易注射，多采用这两条静脉进针。一般要求进针部位靠近小鼠的尾端，这样若注射失败的话，还可以再向上选择进针点。但是进针部位也不可以太靠下，因为越往下，静脉越细，操作越难，一般以小鼠尾巴下三分之一的位置比较好。
4、注射一般使用一次性的1ml的注射器，针头用4号。
5、进针时操作者左手食指和拇指固定住小鼠的尾巴，让小鼠的尾巴在经过拇指后向下弯曲，进针点靠近拇指指甲。针头和血管呈约30°角，针尖斜面朝上，轻轻挑刺入皮肤后针头立即和血管平行，确定针头在血管内后推注药液，正常情况下，推注的过程应该没有明显阻力，血管也不会鼓起。推液时动作宜轻柔，若发现血管鼓起，那是针头没有刺入血管，需立即拔出针头。注射完病毒后，用无酒精棉花止血（千万不能用酒精棉，酒精会加速出血）。
视频教程：
https://www.jove.com/cn/v/61961/a-contemporary-warmingrestraining-device-for-efficient-tail-vein
以上就是两种常用的AAV心脏给药方式。心肌原位注射特异性强但对动物损伤较大，尾静脉注射特异性不如心肌原位注射，但搭配cTNT等特异性启动子同样可以实现目的基因在心肌细胞特异性表达。另外汉恒生物还可以提供心肌成纤维细胞特异性启动子POSTN、COL2A1等。如果对AAV心血管系统给药方式有疑问，欢迎咨询汉恒生物！
参考文献：
[1] Virag, Jitka A I., Lust, Robert M.. Coronary artery ligation and intramyocardial injection in a murine model of infarction. Journal of visualized experiments : JoVE, 2011, (52).
[2] 杨琳珊, 占贞贞, 汪波, et al. 小鼠尾静脉注射与心肌注射腺病毒载体转染效率的比较[J]. 中国比较医学杂志, 2016, 26(8):5.
[3] Yano, Junko., Lilly, Elizabeth A., Noverr, Mairi C., Fidel, Paul L.. A Contemporary Warming/Restraining Device for Efficient Tail Vein Injections in a Murine Fungal Sepsis Model. Journal of visualized experiments : JoVE, 2020, (165).
