组培实验室仪器设备-上海农卉组培

　　目前绝大部分细胞实验室使用超净工作台实现无菌操作，具有操作简单、安装方便、占用空间小且净化效果很好。安徽人和净化为您介绍两种主要超净工作台-侧流式(垂直式)和外流式(水平层流式)。工作原理一般是将室内空气经粗过滤器初滤，由离心风机压入静压箱，再经空气过滤器精滤，由此送出的洁净气流以一定的均匀的断面风速通过无菌区，从而形成无尘无菌的高洁净度工作环境。

　　1）保证无菌操作：植物组织培养是在严格无菌的条件下进行的。要做到无菌的条件，需要一定的环境、设备、器材和用具。

　　2）工作方便：按组织培养程序来没计，避免某些环节倒排，引起日后工作混乱。

　　3）培养条件：人工控制温度、光照、湿度等。

　　标准组织培养室包括药品区、洗涤区、制备区、灭菌区、储放区、无菌操作区和培养区等，可以根据自己的实际条件进行合并组建。

　　主要任务：药品的贮备、称量、溶解、配制、培养基分装。器具的洗涤、干燥、保存、培养基的灭菌等。

　　主要设备：药品柜、防尘橱（放置培养容器）、冰箱、电子天平、蒸馏水器、酸度计、高压灭菌锅、干燥灭菌器（如烘箱）、常用的培养基配制用玻璃仪器、操作台等。

　　主要任务：主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序。

　　主要设备：紫外光源、超净工作台、消毒器、酒精灯、接种器械（接种镊子、剪刀、解剖刀、接种针）等。

　　接种室宜小不宜大，一般7～8平米，要求地面、天花板及四壁尽可能密闭光滑，易于清洁和消毒。配置拉动门，以减少开关门时的空气扰动。

　　接种室要求干爽安静，清洁明亮。在适当位置吊装1～2盏紫外线灭菌灯，用以照射灭菌。安装一小型空调，使室温可控，这样可使门窗紧闭，减少与外界空气对流。接种室应设有缓冲间，面积1m2为宜。进入无菌操作室前在此更衣换鞋，以减少进出时带入接种室杂菌。缓冲间也安一盏紫外线灭菌灯，用以照射灭菌。

　　培养室是将接种的材料进行培养生长的场所。根据需要培养架的大小、数目、及其他附属设备来定面积。其设计以充分利用空间和节省能源为原则。高度比培养架略高为宜，周围墙壁要求有绝热防火的性能。

　　培养室要的因素是温度，一般保持在20—27℃左右，具备产热装置，并安装窗式或立式空调机。

　　培养架一般设5层，低一层离地高约lOcm，其他每层间隔30cm左右，培养架高1．7m左右。其长度根据日光灯长度而设计，如采用40W日光灯，则长I．3m，30W的长lm，宽度一般为60cm。

　　由于热带植物和寒带植物等不同种类要求不同温度，不同种类有不同的培养室。室内湿度也要求恒定，相对湿度以保持在70%～80%为好，可安装加湿器。控制光照时间可安装定时开关钟，一般需要每天光照10-16h，也有的需要连续照明。

　　现代组培实验室大多设计为采用天然太阳光照作为主要能源，这样不但可以节省能源，而且组培苗接受太阳光生长良好，驯化易成活。在阴雨天可用灯光作补充。

　　倒置式显微镜是细胞培养实验室日常工作常规设备，主要用于日常了解细胞的生长情况并观察有没有污染发生。如资金允许，建议选用配置有照相系统的高品质相差显微镜、解剖显微镜、荧光显微镜、录像系统或缩时电影拍摄装置等，可随时拍摄并记录细胞生长情况。

　　体外培养的细胞和体内细胞一样，需要在恒定的温度下生存，一般适生长温度为37℃，温差变化不应超过±0.5℃。温度升高2℃时，变不利于细胞生存，温度达到40℃以上细胞将很快死亡。因此，可控温的恒温培养箱、CO2培养箱是好的选择。

　　应选隔水式或晶体管式自控温培养箱，此类培养箱灵敏度高，温度控制较稳定。一般的恒温培养箱价格较便宜，其缺点是只宜于作密闭式培养。

　　目前多数的细胞培养室已广泛使用。CO2培养箱的优点是能够提供进行细胞培养时所需要的一定量的CO2(常用浓度为百分之5)，易于稳定培养液pH，适用于开放或半开放培养。使用培养瓶时，为使培养瓶内与外界保持通气状态，可将瓶盖略微旋松，为避免细胞被污染，使用这种培养方式时，培养箱内空气须保持清洁，需定期用紫外线照射或酒精消毒，同时培养箱内应放置盛有无菌蒸馏水的水槽，防止培养液蒸发，保持箱内相对湿度在百分之100。

　　储存器常用的液氮容器，根据使用需要分为不同类型和规格。选择液氮容器时需要考虑三个因素：容积大小、取放使用方便、液氮挥发量。液氮容器的大小一般在25-500L，可以储存1ml的冻存管250-15000个左右。液氮温度低温可达-196℃，使用时应注意避免冻伤。由于液氮易挥发，需注意观察剩余液氮量，及时补充，避免液氮不足使细胞受损或死亡。目前有许多智能型细胞冷冻储存器可供选择，可配置有电子控制器的液氮储存器，实现冻存自动化;并可监测液氮水平和样品温度，确保样品温度始终处于设定温度点;可配置报警系统，设置液氮液面、温度、电池、电压、电源等失常情况下报警;同时具备热气体旁路系统，防止高于-130℃的暖空气进入液氮罐，从而更有效地保护样品，防止容器内升温。另外，可选择液氮供应罐通过连接管给储存罐补充液氮，保证样品安全。

　　细胞培养时，通常使用离心机制备细胞悬液、调整细胞密度、洗涤和收集细胞。一般常规配置4000rpm台式离心机;若要做细胞沉降，需要使用80-100G离心力，因为离心力过大会损伤细胞。根据不同要求，有大容量、可调温度离心机、高速离心机和低温冷冻离心机等更多功能离心机可选择。

　　常用的有精密天平和分析天平。分析天平的精确度一般为0.1mg、0.01mg和0.001mg。一般根据取样量量和精度要求选择合适的天平：取样量大于100mg宜选用准确度0.1mg的天平;取样量100-10mg，选用准确度0.01mg的天平;取样量10mg宜选用准确度0.001mg的天平。天平需要定期校准，可选择有自动校准功能的天平，方便维护。天平使用需要注意清洁，避免腐蚀性粉末、液体直接接触称量台。