Indo-1,一种细胞生物学中常用的钙离子荧光探针
2023-08-01 16:08 作者:bili_96594969043 | 我要投稿
Indo-1的简介
Indo-1是一种细胞生物学中常用的钙离子荧光探针,与Fura-2(目前使用最广泛的比率法测定的钙荧光指示剂)相比,Indo-1能特异性地结合钙离子,同时可发出荧光,结合钙离子后的最大发射波长从结合前的475 nm向400 nm(钙离子饱和时)偏移,该信号变化可被流式细胞仪较好的捕捉:在氩离子激光器的351-364nm光谱范围内单一波长激发该探针,在400 nm和475 nm的波长处分别检测结合钙离子和未结合钙离子的荧光信号,通过二者荧光强度的比率测定钙离子浓度。
由于Indo-1是极性大的酸性化合物,无法进入细胞内,为此在其负性基团上结合乙酰氧甲酯,使其成为Indo-1/AM,该变化既增加了酯溶性又消除了负电荷,极大的提高了细胞渗透性。在细胞内,Indo-1/AM被酯酶水解成Indo-1后可与胞浆游离的钙离子可逆性结合。
Indo-1的荧光图谱